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T4 DNA Ligase




货号:D7008

规格:200,000U

交货周期:现货

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产品说明书


产品说明书 D7008 T4 DNA Ligase.pdf

产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D7008 T4 DNA Ligase 200,000U 176.00元

      T4 DNA Ligase即T4 DNA连接酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5'-P末端和3'-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA 连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
      用途:T4 DNA Ligase常用于DNA片段和载体、linker或adaptor等的连接。也可以用于缺刻修复及Ligase介导的RNA检测。
      来源:本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。
      活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of
lambda DNA in 30 min at 16℃ in 20 μl of the assay mixture containing 50 mM Tris, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 μg/ml BSA and a 5'-DNA termini concentration of 0.12 μM (300 μg/ml)。200U等于1个Weiss unit,以Weiss unit计,本产品共1000单位。
      T4 DNA Ligase连接产物转化感受态后涂板LB平板的效果参考图1。

      图1. 本T4 DNA Ligase的连接产物转化感受态细菌后涂板获得的LB平板效果图。A. 双酶切后的载体自连过夜;B. 双酶切后的载体与待插入片段过夜连接。
      纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规连接反应要求。
      酶储存溶液:20 mM Tris, pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA and 50% (v/v) glycerol。
      10× Ligation Buffer:400 mM Tris, pH 7.8, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP。
      失活或抑制:65℃孵育10分钟可以导致T4 DNA Ligase失活;NaCl或KCl浓度大于200mM时强烈抑制T4 DNA Ligase。 
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D7008-1 T4 DNA Ligase (1000U/μl) 20, 000U
D7008-2 10X Ligation Buffer 1.5ml
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项:
      对于普通的转化大肠杆菌的操作,不必对连接产物进行纯化,连接产物可以直接用于转化。但用电转方法转化大肠杆菌时,通常宜先用DNA纯化试剂盒或酚氯仿抽提方法等纯化DNA,然后再进行电转。
      需进行平端连接或快速连接时,推荐使用碧云天的快速DNA连接试剂盒(D7002/D7003)。T4 DNA Ligase可以进行平端连接,但效率较低。
      普通连接反应不必进行凝胶电泳观察。如果需要对于连接产物进行凝胶电泳观察,推荐先在65℃孵育10分钟使
T4 DNA Ligase失活,以避免T4 DNA Ligase和DNA结合导致的条带位置迁移(band shift)。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。