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人外周血淋巴细胞分离液




货号:P8610-200ml

规格:200ml

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DeepBio得分:5567.2
DeepBio得分 是基于文献引用次数,影响因子,文献新近度等因素计算的客观产品评级,得分越高表明该产品经过越可靠的实验验证,质量可信度越高

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产品说明书


产品说明书 人外周血淋巴细胞分离液说明书

外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞等细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同,红细胞和粒细胞密度较大,为1.090 g/ml 左右,而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075~1.090 g/ml,血小板为1.030~1.035 g/ml。为此,将葡聚糖(右旋糖酐)和泛影酸葡甲胺按一定比例混合,调整比重、pH 值和渗透压,经过澄清及过滤除菌后制成一种密度在1.077g/ml 并且近于等渗的溶液(分层液),经过密度梯度离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,从而将各种血细胞加以分离。
 
 
本品为带有乳光或微乳光的注射水溶液,主要组成成份是葡聚糖(右旋糖酐)与泛影酸葡甲胺。适用于从人抗凝血液中分离单个核细胞(主要为淋巴细胞),无菌条件下所分离的细胞可用于免疫学检测。
 
分离方法说明及图例:
 
取新鲜抗凝血1ml,与生理盐水1:1 混匀后,小心加于2ml细胞分离液之液面上;以400g(约1500转/分,半径15cm水平转子)离心20分钟,此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层:为血浆层。第二层:为环状乳白色淋巴细胞层。第三层:为透明分离液层。第四层:为红细胞层。收集第二层细胞放入含生理盐水4-5ml的试管中,充分混匀后,以400g(约1500转/分)离心20分钟。沉淀经2次洗涤后即得所需淋巴细胞。
 
注: 提取率约为80%。
 
 
注意事项:
 
A.本分离液要求血液为新鲜抗凝血,避免冷冻和冷藏;在收集血液和分离过程中,应注意无菌操作,避免微生物污染。
 
B.本实验要求,在正常大气压下,分离液、分离样本以及分离环境温度为20℃±2℃。分离液在低温时呈较高密度,在高温时呈较低密度。细胞分离液从冰箱取出后,不可立即使用,操作前可将样本和分离液置于20℃水浴中复温20分钟以保证分离温度。
 
C.由于各品牌离心机的性能不同,国内南北地区温度环境和四季的差异,可能影响分离效果,用户可以调节离心转数和离心时间,摸索最佳的分离条件(具体分离条件各实验室自定)。
 
D.最好使用无静电反应的离心管,推荐使用未经过碱处理的玻璃离心管。
 
E.最优抗凝剂选择:EDTA、枸橼酸、肝素。应注意在血液稀释过程中应去除抗凝剂体积。
 
 
产品性能指标:
 
密度 1.077±0.001g/ml
 
pH                              7.0-7.5
 
渗透压                         280-340mOsmol/kg
 
内毒素                         ≤0.5EU/ml
 
无菌                           直接接种培养14天后培养基澄清
 
澄明度及不溶性颗粒物           每50ml 溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以下,
 
含25μm 以上的不溶性微粒5 粒以下
 
 
贮藏及保存期限:
 
本分离液是敏光型的,应在18℃-25℃避光保存,有效期两年。启封后置4℃保存,若保证无微生物污染, 4℃可长期保存。保存温度较低(10℃以下)时本分离液易出现白色结晶,影响分离效果。