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T4 DNA Ligase




货号:CL301-02

规格:500U×10

交货周期:现货

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DeepBio得分:5567.2
DeepBio得分 是基于文献引用次数,影响因子,文献新近度等因素计算的客观产品评级,得分越高表明该产品经过越可靠的实验验证,质量可信度越高

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组成 CL301-02
T4 DNA Ligase(5U/μl) 500U×10
5×T4 DNA Ligation Buffer 400μl×10

 

浓度: 5U/μl

 

产品概述:

      在有Mg2+和ATP存在的条件下,T4 DNA Ligase能催化双链 DNA或RNA上相邻的5´-磷酸末端和3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化双链DNA的平末端或粘性末端之间的连接,还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻,但不能催化单链 DNA 之间的连接。

 

保存条件:-20℃保存,有效期一年。

 

酶储存缓冲液

10 mM Tris-HCl (pH 7.5) ,50mM KCl,1mM DTT, 0.1mM EDTA,50% (v/v) glycerol。

5 × T4 DNA Ligase Buffer

250 mMTris-HCl (pH 7.5), 50mM MgCl2,50mM DTT, 50mM ATP,连接促进剂。

 

   纯化于携带T4 DNA ligase 基因 的E. coli 菌株。

 

抑制剂和热失活大于200mM的NaCl或KCl可以强烈抑制连接酶活性。65℃加热 10分钟或70℃加热5分钟即可失活。

 

单位定义

       在37℃,20分钟内交换1 nmole 的32PPi所需要的酶量定义为一个Weiss单位。本产品酶1U(Weiss Unit)相当于200个粘性末端单位。在T4 DNA 连接酶反应缓冲液中,16℃条件下,30分钟能够使50%的经Hind III消化的λDNA 片段连接所需要的酶量为一个粘性末端单位。

 

质量控制

        蓝白斑分析实验表明白斑数小于2%;过量T4 DNA Ligase 混合超螺旋质粒检测实验表明无核酸酶检出;SDS-PAGE检测重组蛋白纯度大于99%。

 

 

   双链DNA粘性末端和平末端的连接;TA克隆;双链DNA的切刻修复等。