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QIAGEN Plasmid Maxi Kit (25次)




货号:12163

规格:kit

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DeepBio得分:5567.2
DeepBio得分 是基于文献引用次数,影响因子,文献新近度等因素计算的客观产品评级,得分越高表明该产品经过越可靠的实验验证,质量可信度越高

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纯化至多10 mg转染级质粒或柯斯质粒DNA

  • 纯化得到相当于连续2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度
  • 高产量质粒DNA
  • 经济的制备方法
  • 使用LyseBlue,获得最佳的裂解效果和最大的DNA产量

QIAGEN Plasmid Kits应用重力流阴离子交换柱纯化转染级质粒DNA。该试剂盒可纯化获得至多10 mg的质粒DNA。离心获得澄清的裂解产物和异丙醇沉淀。

Product Details

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转染效率与质粒纯化方法。
采用不同方法制备pRSVcat DNA,通过脂质体介导的转染将其导入指定的细胞系内,40小时后测定CAT表达水平,确定转染效率。每个柱形代表4个独立的转录的平均值(2个质粒制备物分别转染2次)。使用QIAGEN Plasmid Kit可获得最高的转染效率。
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QIAGEN Plasmid Kit procedures.
Neutralized bacterial lysates are cleared by centrifugation. The cleared lysate is then loaded onto the anion-exchange tip where plasmid DNA selectively binds under appropriate low-salt and pH conditions. RNA, proteins, metabolites, and other low-molecular-weight impurities are removed by a medium-salt wash, and ultrapure plasmid DNA is eluted in high-salt buffer. The DNA is concentrated and desalted by isopropanol precipitation and collected by centrifugation.
Performance
QIAGEN Plasmid Kit利用重力流QIAGEN阴离子交换柱技术高效纯化质粒DNA。产量可达10 mg(Giga)、2.5 mg(Mega)、500 µg(Maxi)、或100 µg(Midi)高拷贝质粒DNA(培养体积取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌株和培养基。)QIAGEN Plasmid Kits纯化的质粒DNA适合多种应用,如:转染(参见" Transfection efficiency versus plasmid purification method")、克隆和体外转录。
Principle

QIAGEN-tips内独特的阴离子交换树脂专为纯化核酸设计。它独特的分离特性,使纯化的DNA的纯度相当于连续2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度。预装的QIAGEN-tips利用重力流原理工作,缩短了纯化质粒的手动操作时间。整套QIAGEN质粒纯化体系避免苯酚、氯仿、溴化乙锭和CsCl等有毒物质,减小对使用者和环境的危害。

Procedure

使用QIAGEN Plasmid Kits,细菌裂解物通过离心澄清。澄清后的裂解物上样到阴离子交换柱,质粒DNA在适当的低盐条件和pH条件下与树脂进行选择性结合。RNA、蛋白质、代谢产物和和其它低分子量杂质用中盐洗涤液去除,用高盐缓冲液洗脱纯质粒DNA(参见"QIAGEN Plasmid Kit procedures")。得到的DNA用异丙醇沉淀浓缩和脱盐后,离心收集。

Applications

QIAGEN Plasmid Kits纯化质粒DNA适合多种应用,如:

  • 转染
  • 克隆
  • PCR
  • 体外转录

Specifications

Features
Specifications
应用 Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing etc.
起始样本体积 2.5–5 liters culture volume
质粒类型 High-copy, low-copy, cosmid DNA
处理 Manual (centrifugation)
每次处理样本量;通量 1 sample per run
技术 Anion-exchange technology
每次运行时间或处理样本数 320 min
产量 <10 mg